Ανάλυση αμινοξέων σε πεπτίδια εξηγείται
Ανάλυση αμινοξέων στα πεπτίδια: επεξήγηση της σύστασης και της ποσοτικοποίησης
Τα πεπτίδια αποτελούνται από αλυσίδες αμινοξέων. Η αλληλουχία αυτών των αμινοξέων καθορίζει μεγάλο μέρος των χημικών και δομικών ιδιοτήτων ενός πεπτιδίου.
Στον ποιοτικό έλεγχο, χρησιμοποιούνται συχνά τεχνικές όπως η HPLC και η φασματομετρία μάζας για την αξιολόγηση της καθαρότητας και της μοριακής μάζας. Μια συμπληρωματική μέθοδος ανάλυσης είναι η ανάλυση αμινοξέων, που συχνά συντομογραφείται ως AAA.
Η ανάλυση αμινοξέων μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την εξέταση:
- ποια αμινοξέα υπάρχουν σε ένα δείγμα·
- πώς οι μετρούμενες αναλογίες αμινοξέων αντιστοιχούν στην αναμενόμενη σύσταση·
- πόσο πεπτίδιο υπάρχει·
- αν η σύσταση αμινοξέων αντιστοιχεί στο θεωρητικό πεπτίδιο·
- πώς μπορεί να υπολογιστεί η καθαρή περιεκτικότητα σε πεπτίδιο.
Η μέθοδος λειτουργεί διαφορετικά από την HPLC και τη φασματομετρία μάζας. Στην κλασική ανάλυση αμινοξέων, η πεπτιδική αλυσίδα διασπάται πρώτα σε μεμονωμένα αμινοξέα. Στη συνέχεια, αυτά τα αμινοξέα διαχωρίζονται, ανιχνεύονται και ποσοτικοποιούνται.
Η ανάλυση αμινοξέων μπορεί να παρέχει πολύτιμες πληροφορίες, αλλά έχει και περιορισμούς. Κατά τη διάσπαση, ορισμένα αμινοξέα μπορεί να μεταβληθούν εν μέρει ή να χαθούν. Επομένως, τα αποτελέσματα πρέπει πάντα να ερμηνεύονται στο πλαίσιο της χρησιμοποιούμενης μεθόδου.
Τι είναι η ανάλυση αμινοξέων;
Η ανάλυση αμινοξέων είναι μια εργαστηριακή τεχνική με την οποία εξετάζεται η σύσταση αμινοξέων ενός δείγματος.
Σε μια κλασική ανάλυση εκτελούνται συνήθως τα ακόλουθα βήματα:
- προετοιμασία του δείγματος·
- υδρόλυση της πεπτιδικής αλυσίδας·
- απελευθέρωση μεμονωμένων αμινοξέων·
- διαχωρισμός των αμινοξέων·
- ανίχνευση και ποσοτικοποίηση·
- σύγκριση με την αναμενόμενη σύσταση.
Το αποτέλεσμα μπορεί να παρουσιαστεί ως:
- ποσότητα ανά αμινοξύ·
- μοριακή αναλογία·
- συγκέντρωση κατά μάζα·
- προφίλ αμινοξέων·
- υπολογισμένη περιεκτικότητα σε πεπτίδιο.
Τι είναι η υδρόλυση;
Η υδρόλυση είναι μια χημική διαδικασία κατά την οποία οι δεσμοί διασπώνται με τη βοήθεια νερού.
Στην ανάλυση αμινοξέων, οι πεπτιδικοί δεσμοί διασπώνται, ώστε να απελευθερωθούν μεμονωμένα αμινοξέα.
Μια ευρέως χρησιμοποιούμενη μέθοδος είναι η όξινη υδρόλυση.
Κατά τη διαδικασία, το δείγμα εκτίθεται για ελεγχόμενο χρονικό διάστημα σε:
- ισχυρό οξύ·
- αυξημένη θερμοκρασία·
- ελεγχόμενες συνθήκες.
Μετά την υδρόλυση, η αρχική πεπτιδική αλυσίδα δεν υπάρχει πλέον ως άθικτο μόριο.
Τα αμινοξέα που απελευθερώνονται μπορούν στη συνέχεια να εξεταστούν ξεχωριστά.
Γιατί διασπάται η πεπτιδική αλυσίδα;
Ένα άθικτο πεπτίδιο μπορεί να περιέχει δεκάδες διαφορετικά κατάλοιπα αμινοξέων.
Με τη διάσπαση της αλυσίδας, μπορεί να μετρηθεί η συνολική ποσότητα κάθε αμινοξέος.
Ας υποθέσουμε ότι ένα θεωρητικό πεπτίδιο περιέχει:
- τέσσερα κατάλοιπα αλανίνης·
- δύο κατάλοιπα γλυκίνης·
- τρία κατάλοιπα λευκίνης·
- ένα κατάλοιπο τυροσίνης.
Μετά την υδρόλυση, μπορεί να εξεταστεί κατά πόσο οι μετρούμενες αναλογίες αντιστοιχούν περίπου σε αυτή τη θεωρητική σύνθεση.
Αυτό υποστηρίζει την αξιολόγηση της σύστασης των αμινοξέων.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ της σύνθεσης αμινοξέων και της αλληλουχίας αμινοξέων;
Η ανάλυση αμινοξέων μετρά κυρίως ποια αμινοξέα υπάρχουν και σε ποια ποσότητα.
Η μέθοδος δεν προσδιορίζει αυτόματα την ακριβή σειρά.
Δύο διαφορετικά πεπτίδια μπορεί να έχουν την ίδια σύνθεση αμινοξέων, αλλά διαφορετική σειρά.
Για παράδειγμα:
- Ala-Gly-Leu;
- Leu-Gly-Ala.
Και τα δύο περιέχουν:
- μία αλανίνη·
- μία γλυκίνη·
- μία λευκίνη.
Ωστόσο, η αλληλουχία είναι διαφορετική.
Για την ανάλυση αλληλουχίας απαιτούνται άλλες τεχνικές, όπως:
- φασματομετρία μάζας διαδοχικών σταδίων·
- ανάλυση θραυσμάτων·
- ειδικές μέθοδοι προσδιορισμού αλληλουχίας.
Μπορεί η ανάλυση αμινοξέων να επιβεβαιώσει την ταυτότητα;
Η ανάλυση αμινοξέων μπορεί να υποστηρίξει την αναμενόμενη σύνθεση.
Όταν το μετρούμενο προφίλ αμινοξέων αποκλίνει σημαντικά από τη θεωρητική σύνθεση, αυτό μπορεί να αποτελέσει αφορμή για περαιτέρω έρευνα.
Ωστόσο, ένα αντίστοιχο προφίλ δεν αποδεικνύει από μόνο του ότι η ακριβής αλληλουχία αμινοξέων είναι σωστή.
Για μια ευρύτερη αξιολόγηση ταυτότητας μπορούν να συνδυαστούν:
- μοριακή μάζα;
- LC-MS;
- MS/MS;
- ανάλυση αμινοξέων·
- χρωματογραφικά δεδομένα.
Πώς διαχωρίζονται τα αμινοξέα;
Μετά την υδρόλυση, το δείγμα περιέχει ένα μείγμα ελεύθερων αμινοξέων.
Αυτά πρέπει να διαχωριστούν αναλυτικά μεταξύ τους.
Πιθανές τεχνικές είναι:
- χρωματογραφία ιοντοανταλλαγής·
- HPLC;
- UPLC·
- τριχοειδής ηλεκτροφόρηση.
Η επιλεγμένη τεχνική εξαρτάται από:
- επιθυμητή ευαισθησία·
- εργαστηριακή μέθοδος·
- τύπος δείγματος·
- απαιτούμενη ακρίβεια.
Τι είναι η παραγωγοποίηση;
Πολλά αμινοξέα έχουν περιορισμένη ανιχνευσιμότητα χωρίς πρόσθετη επεξεργασία.
Επομένως, μπορούν να συνδεθούν χημικά με μια ανιχνεύσιμη ομάδα.
Αυτό ονομάζεται παραγωγοποίηση.
Η παραγωγοποίηση μπορεί να πραγματοποιηθεί:
- πριν από τον χρωματογραφικό διαχωρισμό·
- μετά τον χρωματογραφικό διαχωρισμό.
Τα παράγωγα που σχηματίστηκαν μπορούν να μετρηθούν καλύτερα, για παράδειγμα, με:
- ανίχνευση UV·
- ανίχνευση φθορισμού·
- φασματομετρία μάζας.
Παραγωγοποίηση πριν από τη στήλη
Κατά την παραγωγοποίηση πριν από τη στήλη, τα αμινοξέα επισημαίνονται πριν από τον χρωματογραφικό διαχωρισμό.
Στη συνέχεια, τα παράγωγα που σχηματίστηκαν διαχωρίζονται μέσω στήλης.
Τα πιθανά πλεονεκτήματα περιλαμβάνουν:
- υψηλή ευαισθησία·
- κατάλληλη ανίχνευση φθορισμού·
- ανάλυση πολλαπλών αμινοξέων.
Η αντίδραση πρέπει να πραγματοποιείται με αναπαραγώγιμο τρόπο.
Η ατελής παραγώγιση μπορεί να επηρεάσει την ποσοτικοποίηση.
Παραγώγιση μετά τη στήλη
Κατά την παραγώγιση μετά τη στήλη, τα αμινοξέα διαχωρίζονται πρώτα.
Μετά τη στήλη, αντιδρούν με ένα αντιδραστήριο ανίχνευσης.
Ένα γνωστό παράδειγμα είναι η ανάλυση με νινυδρίνη.
Τα προϊόντα της αντίδρασης που σχηματίστηκαν μπορούν στη συνέχεια να μετρηθούν οπτικά.
Πώς προσδιορίζεται η ποσότητα του αμινοξέος;
Για την ποσοτικοποίηση χρησιμοποιούνται πρότυπα αναφοράς.
Τα πρότυπα διαλύματα περιέχουν γνωστές ποσότητες αμινοξέων.
Αυτά μετρώνται για να καθοριστεί μια σχέση μεταξύ:
- συγκέντρωση·
- σήμα του ανιχνευτή.
Στη συνέχεια μετράται το άγνωστο δείγμα.
Με τη βοήθεια των δεδομένων βαθμονόμησης μπορεί να υπολογιστεί η ποσότητα κάθε αμινοξέος.
Τι είναι ένα εσωτερικό πρότυπο;
Ένα εσωτερικό πρότυπο είναι μια γνωστής ποσότητας ουσία που προστίθεται στα δείγματα και στα διαλύματα βαθμονόμησης.
Αυτό μπορεί να βοηθήσει στη διόρθωση της μεταβλητότητας κατά την:
- προετοιμασία δείγματος·
- έγχυση·
- παραγώγιση·
- ανάλυση.
Το εσωτερικό πρότυπο πρέπει να διακρίνεται καλά αναλυτικά από τα εξεταζόμενα αμινοξέα.
Πώς μπορεί η ανάλυση αμινοξέων να προσδιορίσει την περιεκτικότητα σε πεπτίδια;
Όταν είναι γνωστή η αμινοξική σύσταση ενός πεπτιδίου, επιλεγμένα αμινοξέα μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τον υπολογισμό της ποσότητας του πεπτιδίου.
Ας υποθέσουμε ότι κάθε πεπτιδική αλυσίδα περιέχει ακριβώς τέσσερα κατάλοιπα αλανίνης.
Όταν μετράται η συνολική ποσότητα αλανίνης, μπορεί να εκτιμηθεί από αυτήν πόσες πεπτιδικές αλυσίδες υπήρχαν.
Ο υπολογισμός λαμβάνει υπόψη:
- αριθμός καταλοίπων ανά πεπτίδιο·
- μοριακή μάζα;
- μετρημένη ποσότητα αμινοξέος·
- αναλυτική μέθοδος.
Αυτό μπορεί να χρησιμοποιηθεί για μια ποσοτική ανάλυση πεπτιδίων.
Γιατί δεν χρησιμοποιούνται πάντα όλα τα αμινοξέα;
Δεν είναι κάθε αμινοξύ εξίσου κατάλληλο για ποσοτικοποίηση.
Ορισμένα αμινοξέα μπορούν κατά την υδρόλυση:
- να διασπαστούν μερικώς·
- να μεταβληθούν χημικά·
- να απελευθερωθούν ατελώς·
- να μετρηθούν αξιόπιστα.
Γι’ αυτό επιλέγονται συχνά σταθερά αμινοξέα.
Η επιλογή εξαρτάται από την αλληλουχία του πεπτιδίου και τη μέθοδο ανάλυσης.
Ποια αμινοξέα μπορούν να μεταβληθούν κατά την υδρόλυση;
Η όξινη υδρόλυση μπορεί να έχει διάφορες επιδράσεις.
Τρυπτοφάνη
Η τρυπτοφάνη μπορεί να διασπαστεί σε μεγάλο βαθμό κατά την τυπική όξινη υδρόλυση.
Επομένως, απαιτούνται προσαρμοσμένες μέθοδοι όταν η τρυπτοφάνη πρέπει να μετρηθεί ειδικά.
Ασπαραγίνη
Η ασπαραγίνη μπορεί να μετατραπεί σε ασπαρτικό κατά την υδρόλυση.
Κατά συνέπεια, η ασπαραγίνη και το ασπαρτικό δεν αναφέρονται πάντα ξεχωριστά στην κλασική ανάλυση.
Γλουταμίνη
Η γλουταμίνη μπορεί να μετατραπεί σε γλουταμινικό.
Έτσι, η γλουταμίνη και το γλουταμινικό μπορούν να εμφανίζονται μαζί.
Serine
Η σερίνη μπορεί να χαθεί εν μέρει κατά την παρατεταμένη υδρόλυση.
Θρεονίνη
Και η θρεονίνη μπορεί να αποικοδομηθεί μερικώς.
Κυστεΐνη
Η κυστεΐνη μπορεί να υποστεί οξειδωτικές μεταβολές.
Για αξιόπιστη ανάλυση μπορεί να απαιτείται προκαταρκτική οξείδωση ή προσαρμοσμένη μέθοδος.
Γιατί είναι σημαντικός ο χρόνος υδρόλυσης;
Οι πεπτιδικοί δεσμοί πρέπει να διασπαστούν επαρκώς.
Η πολύ σύντομη υδρόλυση μπορεί να οδηγήσει σε:
- ατελής διάσπαση·
- πολύ χαμηλές μετρούμενες τιμές αμινοξέων.
Η υπερβολικά παρατεταμένη υδρόλυση μπορεί να οδηγήσει σε:
- περαιτέρω διάσπαση ευαίσθητων αμινοξέων·
- απώλεια κατά τη μέτρηση.
Γι’ αυτό ελέγχονται ο χρόνος και η θερμοκρασία υδρόλυσης.
Μερικές φορές χρησιμοποιούνται πολλαπλοί χρόνοι υδρόλυσης για τη διερεύνηση της απώλειας ή της ατελούς διάσπασης.
Τι είναι η μοριακή αναλογία;
Μια μοριακή αναλογία περιγράφει τις σχετικές ποσότητες των αμινοξέων.
Ας υποθέσουμε ότι ένα πεπτίδιο θεωρητικά περιέχει:
- δύο αλανίνες·
- μία γλυκίνη·
- τρεις λευκίνες.
Η θεωρητική μοριακή αναλογία είναι:
2 : 1 : 3
Μετά την ανάλυση, οι μετρούμενες τιμές μπορούν να κανονικοποιηθούν.
Όταν η αναλογία βρίσκεται κοντά στη θεωρητική τιμή, αυτό υποστηρίζει την αναμενόμενη σύνθεση αμινοξέων.
Μικρές αποκλίσεις μπορεί να προκύψουν λόγω:
- αβεβαιότητα μέτρησης·
- απώλεια κατά την υδρόλυση·
- παραγώγιση·
- ολοκλήρωση χρωματογραφικών κορυφών.
Τι σημαίνει κανονικοποίηση;
Κατά την κανονικοποίηση, οι μετρούμενες τιμές αμινοξέων μετατρέπονται σε σχετικές αναλογίες.
Ένα κατάλληλο αμινοξύ μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως αναφορά.
Με αυτόν τον τρόπο, το μετρούμενο προφίλ μπορεί να συγκριθεί με τη θεωρητική σύνθεση.
Η κανονικοποίηση είναι χρήσιμη για την ανάλυση της σύνθεσης, αλλά δεν παρέχει αυτόματα την απόλυτη ποσότητα πεπτιδίων.
Ανάλυση αμινοξέων έναντι καθαρότητας HPLC
Η καθαρότητα HPLC και η ανάλυση αμινοξέων μετρούν διαφορετικές ιδιότητες.
Η καθαρότητα HPLC εξετάζει συνήθως:
- κύρια χρωματογραφική κορυφή·
- σχετική ποσότητα δευτερευουσών κορυφών.
Η ανάλυση αμινοξέων εξετάζει:
- σύνθεση αμινοξέων·
- ποσότητα επιλεγμένων αμινοξέων·
- πιθανή ποσοτικοποίηση πεπτιδίων.
Η υψηλή καθαρότητα HPLC δεν αποδεικνύει αυτόματα ότι η σύνθεση αμινοξέων είναι σωστή.
Μια κατάλληλη σύνθεση αμινοξέων δεν αποδεικνύει αυτόματα ότι δεν υπάρχουν ακαθαρσίες που σχετίζονται με πεπτίδια.
Οι τεχνικές αλληλοσυμπληρώνονται.
Ανάλυση αμινοξέων έναντι φασματομετρίας μάζας
Η φασματομετρία μάζας εξετάζει την αναλογία μάζας προς φορτίο των μορίων.
Μια μέτρηση της άθικτης μάζας μπορεί να επιβεβαιώσει ότι η μοριακή μάζα αντιστοιχεί στη θεωρητική τιμή.
Η ανάλυση αμινοξέων εξετάζει την ποσότητα και την αναλογία των αμινοξέων μετά την υδρόλυση.
Και οι δύο τεχνικές έχουν διαφορετικά πλεονεκτήματα.
Ένας συνδυασμός μπορεί να παρέχει περισσότερες πληροφορίες σχετικά με:
- ταυτότητα
- σύνθεση·
- περιεκτικότητα σε πεπτίδιο.
Ανάλυση αμινοξέων έναντι προσδιορισμού πεπτιδίου
Η ανάλυση αμινοξέων μπορεί να χρησιμοποιηθεί η ίδια ως μέθοδος προσδιορισμού.
Μια δοκιμή πεπτιδίου περιγράφει τον σκοπό:
προσδιορισμός της ποσότητας πεπτιδίου.
Η ανάλυση αμινοξέων είναι μία από τις τεχνικές με τις οποίες μπορεί να επιτευχθεί αυτός ο στόχος.
Άλλες πιθανές μέθοδοι προσδιορισμού είναι:
- ποσοτική HPLC·
- φασματοφωτομετρία UV·
- ποσοτικοποίηση LC-MS·
- ισοζύγιο μάζας.
Ποια είναι η επίδραση των αντιιόντων;
Αντιιόντα όπως:
- οξικό·
- χλωρίδιο·
- TFA·
συμβάλλουν στη συνολική μάζα του λυοφιλοποιημένου υλικού.
Κατά την ανάλυση αμινοξέων εξετάζονται κυρίως τα συστατικά αμινοξέων του πεπτιδίου.
Έτσι, η μέθοδος μπορεί να βοηθήσει στη διάκριση μεταξύ:
- συνολική μάζα υλικού·
- πραγματική ποσότητα πεπτιδίου.
Για ένα πλήρες ισοζύγιο μάζας ενδέχεται να απαιτούνται συμπληρωματικές αναλύσεις.
Ποια είναι η επίδραση της υπολειμματικής υγρασίας;
Η υπολειμματική υγρασία συμβάλλει στο συνολικό βάρος, αλλά όχι στη σύνθεση αμινοξέων.
Κατά τον υπολογισμό της καθαρής περιεκτικότητας σε πεπτίδιο, η ανάλυση υγρασίας μπορεί να παρέχει συμπληρωματικές πληροφορίες.
Ένα εκτενές ισοζύγιο μάζας μπορεί να περιλαμβάνει:
- περιεκτικότητα σε πεπτίδιο·
- περιεκτικότητα σε νερό·
- περιεκτικότητα σε αντιιόντα·
- λοιπά συστατικά.
Μπορεί η ανάλυση αμινοξέων να αποκαλύψει προσμείξεις;
Ορισμένα μη αναμενόμενα σήματα αμινοξέων μπορεί να υποδεικνύουν απρόσμενα συστατικά.
Ωστόσο, η μέθοδος δεν έχει σχεδιαστεί για την ανίχνευση κάθε πιθανής πρόσμειξης.
Για τα ακόλουθα ενδέχεται να απαιτούνται άλλες τεχνικές:
- οργανικές προσμείξεις·
- υπολειμματικοί διαλύτες·
- μέταλλα·
- μικροβιολογική επιμόλυνση·
- ενδοτοξίνες.
Τι μπορεί να αναγράφεται σε ένα COA;
Ένα πιστοποιητικό ανάλυσης μπορεί να περιέχει πληροφορίες όπως:
- δοκιμή: ανάλυση αμινοξέων·
- αναλυτική μέθοδος·
- μετρημένες αναλογίες αμινοξέων·
- θεωρητικές αναλογίες·
- υπολογισμένη περιεκτικότητα σε πεπτίδιο·
- ημερομηνία δοκιμής·
- αριθμός παρτίδας.
Δεν περιλαμβάνει κάθε COA ανάλυση αμινοξέων.
Όταν έχουν πραγματοποιηθεί μόνο HPLC και MS, δεν μπορεί να συναχθεί πλήρης ποσοτικοποίηση αμινοξέων από αυτά.
Γιατί είναι σημαντική η σύνδεση με την παρτίδα;
Μια ανάλυση αμινοξέων πρέπει να συνδέεται με την εξεταζόμενη παρτίδα.
Σημαντικά δεδομένα είναι:
- αριθμός παρτίδας·
- ονομασία προϊόντος·
- ημερομηνία ανάλυσης·
- εργαστήριο·
- αναλυτική μέθοδος.
Μια αναλυτική έκθεση χωρίς σαφή σύνδεση με την παρτίδα έχει μικρότερη αξία για την ιχνηλασιμότητα.
Τι σημαίνει αβεβαιότητα μέτρησης;
Κάθε ποσοτική ανάλυση περιλαμβάνει αβεβαιότητα μέτρησης.
Κατά την ανάλυση αμινοξέων, πηγές μεταβλητότητας μπορεί να είναι:
- προετοιμασία δείγματος·
- υδρόλυση·
- απώλεια αμινοξέων·
- παραγώγιση·
- βαθμονόμηση·
- χρωματογραφικός διαχωρισμός·
- ολοκλήρωση κορυφών.
Επομένως, τα αποτελέσματα δεν πρέπει να θεωρούνται απολύτως αλάνθαστα.
Γιατί είναι σημαντική η επικύρωση της μεθόδου;
Μια μέθοδος πρέπει να είναι κατάλληλη για τον επιδιωκόμενο σκοπό.
Στην ποσοτική ανάλυση αμινοξέων, σχετικά χαρακτηριστικά επικύρωσης μπορεί να είναι:
- ορθότητα;
- ακρίβεια;
- γραμμικότητα;
- ειδικότητα;
- εύρος μέτρησης;
- ανθεκτικότητα;
- επαναληψιμότητα.
Μια μέθοδος κατάλληλη για ένα ποιοτικό προφίλ αμινοξέων δεν επαρκεί αυτομάτως για την ακριβή ποσοτικοποίηση πεπτιδίων.
Επιστημονικοί περιορισμοί
Η ανάλυση αμινοξέων έχει σημαντικούς περιορισμούς.
Η μέθοδος δεν καθορίζει αυτόνομα:
- ακριβής αλληλουχία αμινοξέων;
- μοριακή μάζα;
- καθαρότητα HPLC;
- τρισδιάστατη δομή;
- βιολογική δραστικότητα;
- στειρότητα;
- περιεκτικότητα σε ενδοτοξίνες.
Επιπλέον, ορισμένα αμινοξέα μπορεί να μεταβληθούν κατά την υδρόλυση.
Για μια ολοκληρωμένη αξιολόγηση ποιότητας, πρέπει να συνδυάζονται πολλαπλές αναλυτικές τεχνικές.
Σύνοψη
Η ανάλυση αμινοξέων εξετάζει τη σύνθεση και την ποσότητα των αμινοξέων σε ένα πεπτίδιο.
Στην κλασική ανάλυση, η πεπτιδική αλυσίδα διασπάται πρώτα μέσω υδρόλυσης.
Στη συνέχεια, τα αμινοξέα:
- διαχωρίζονται;
- ανιχνεύονται;
- ποσοτικοποιούνται;
- σε σύγκριση με τη θεωρητική σύνθεση.
Η ανάλυση αμινοξέων μπορεί να χρησιμοποιηθεί για:
- έλεγχο της σύνθεσης αμινοξέων;
- αξιολόγηση των μοριακών αναλογιών;
- ποσοτικοποίηση της περιεκτικότητας σε πεπτίδιο;
- υποστήριξη της ταυτότητας.
Η μέθοδος έχει περιορισμούς, επειδή ορισμένα αμινοξέα μπορεί να μεταβληθούν κατά την υδρόλυση.
Γι’ αυτό, η ανάλυση αμινοξέων συνιστάται να συνδυάζεται με:
- HPLC;
- LC-MS;
- MS/MS;
- δοκιμασία πεπτιδίου;
- ανάλυση υπολειπόμενης υγρασίας;
- ανάλυση αντισταθμιστικών ιόντων.
Αποποίηση ευθύνης για την έρευνα
Τα ερευνητικά πεπτίδια της Peptidera προσφέρονται αποκλειστικά για Research Use Only (RUO) και προορίζονται για εργαστηριακή έρευνα και αναλυτικές εφαρμογές.
Δεν προορίζεται για κατανάλωση από ανθρώπους ή ζώα, διαγνωστική χρήση, θεραπευτική εφαρμογή ή αυτοχορήγηση.
Γνώση πεπτιδίων & ποιοτικός έλεγχος
Σχετικά προϊόντα Peptidera:
Λυοφιλοποιημένα ερευνητικά πεπτίδια με αναγνώριση παρτίδας και διαθέσιμα αναλυτικά δεδομένα ποιότητας
Σχετικά εσωτερικά ιστολόγια:
- PB-0230 — Καθαρότητα πεπτιδίων και HPLC
- PB-0231 — Φασματομετρία μάζας στα πεπτίδια
- PB-0233 — Δοκιμασία πεπτιδίου: καθαρότητα έναντι περιεκτικότητας σε πεπτίδιο
- PB-0234 — Υπολειπόμενη υγρασία σε λυοφιλοποιημένα πεπτίδια
- PB-0238 — Αντισταθμιστικά ιόντα στα πεπτίδια
Προτάσεις εσωτερικών συνδέσμων:
- Σύνδεσμος προς το PB-0233 σχετικά με την ανάλυση αμινοξέων ως δοκιμασία πεπτιδίου
- Σύνδεσμος προς το PB-0230 σχετικά με τη διαφορά από την καθαρότητα HPLC
- Σύνδεσμος προς το PB-0231 σχετικά με τη μοριακή μάζα και την ανάλυση αλληλουχίας
- Σύνδεσμος προς το PB-0234 σχετικά με την υπολειπόμενη υγρασία και την καθαρή περιεκτικότητα σε πεπτίδιο
- Σύνδεσμος προς το PB-0238 σχετικά με τα αντισταθμιστικά ιόντα και το ισοζύγιο μάζας
- Σύνδεσμος προς τη σελίδα της Peptidera με πιστοποιητικά ανάλυσης
- Σύνδεσμος προς τη συλλογή ερευνητικών πεπτιδίων